Sa pcr aling hakbang ang nangangailangan ng thermostable enzyme?

Talaan ng mga Nilalaman:

Sa pcr aling hakbang ang nangangailangan ng thermostable enzyme?
Sa pcr aling hakbang ang nangangailangan ng thermostable enzyme?

Video: Sa pcr aling hakbang ang nangangailangan ng thermostable enzyme?

Video: Sa pcr aling hakbang ang nangangailangan ng thermostable enzyme?
Video: PCR (Polymerase Chain Reaction) Explained 2024, Marso
Anonim

Taq polymerase Tulad ng DNA replication sa isang organismo, ang PCR ay nangangailangan ng DNA polymerase enzyme na gumagawa ng mga bagong strand ng DNA, gamit ang mga kasalukuyang strand bilang mga template. Ang DNA polymerase na karaniwang ginagamit sa PCR ay tinatawag na Taq polymerase, pagkatapos ng heat-tolerant bacterium kung saan ito nahiwalay (Thermus aquaticus).

Bakit kailangan ang thermostable DNA polymerase para sa PCR?

Ang

aquaticus ay isang bacterium na naninirahan sa mga hot spring at hydrothermal vent, at ang Taq polymerase ay natukoy bilang isang enzyme na kayang makatiis sa mga kondisyong nagde-denaturing ng protina (mataas na temperatura) na kinakailangan habang PCR.

Aling hakbang ang ginagamit sa PCR thermostable enzyme?

Ang isang thermostable na DNA polymerase ay ginagamit sa paulit-ulit na cycle ng primer annealing, DNA synthesis at dissociation ng duplex DNA upang magsilbi bilang mga bagong template. Ang theoretical amplification ng template DNA, kung ipagpalagay na ang mga reagents ay hindi nililimitahan at ang enzyme ay nagpapanatili ng buong aktibidad, ay 2 kung saan ang n ay ang bilang ng mga cycle.

Saang mga hakbang ng PCR enzymes ginagamit?

Tatlong hakbang ng PCR─denaturation, annealing, at extension─gaya ng ipinapakita sa unang cycle, at ang exponential amplification ng target na DNA na may paulit-ulit na pagbibisikleta.

Aling enzyme ang ginagamit para sa amplification sa PCR?

Ang

Taq DNA polymerase ay karaniwang ginagamit upang palakihin ang mga produktong PCR na 5kb o mas mababa. Ang mga produkto ng PCR sa hanay na 5–10kb ay maaaring palakihin gamit ang Taq DNA polymerase ngunit kadalasan ay nangangailangan ng higit na pag-optimize kaysa sa mas maliliit na produkto ng PCR.

Inirerekumendang: